エクソソームの回収と検出方法

エクソソームの回収と検出方法

エクソソームの回収には、主に超遠心法、抗体を用いた回収法、サイズ排除クロマトグラフィーが用いられます。こううち、現時点では超遠心法がゴールドスタンダードであると考えられています。2000Gのような低速遠心で細胞デブリを除去した後、10万G以上の超遠心を行ってエクソソームを沈殿させます。
例：細胞の培養上清では21万G・70分・4℃（Optima XE-90：ベックマン・コールター社）、血清では21万・25分・4℃（Optima MAX-XP：ベックマン・コールター社）
しかし、回収率が悪く、手間と時間がかかり多検体を一度に処理できない為に、臨床的には問題を抱えています。他の回収方法として、抗体による回収が挙げられます。これは、CD9抗体やCD63抗体などエクソソームに特異的な抗体を固定したビーズなどを用いて単離する方法です。また、ExoQuick（System Biociences社）や、Total Exosome RNA&Potein Isolation Kit（Thermo Fisher Scintific社）などのキットも販売されています。これらの方法は、超遠心機を用いない利点がある一方、エクソソーム回収の原理が異なっているため、研究内容に応じての使用の向き不向きを考える必要があります。

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